粗纤维的测定[酸性洗涤剂法(ADF)]
一、粗纤测定方法选择的[酸依据 长期以来,测定粗纤维常用酸(H2SO4 )碱(NaOH)交替浸煮法。性洗该法操作手续冗长,涤剂测定条件不易控制,粗纤测定而且试样经沸热NaOH溶液处理时,[酸木质素有不等比例的性洗溶解,使粗纤维的涤剂测得值偏低,从而使“无氮浸出物”含量偏高。粗纤测定 范苏士特的[酸酸性洗涤剂法(ADF)操作较简便,是性洗一个快速的方法。测得的涤剂“酸-洗涤剂纤维”较前法为高。酸-洗涤剂法对纤维素的粗纤测定回收率以及它的结果与样品的消化率之间相关系数都高于前法。采用酸性洗涤剂法,[酸必要时还可以接着分离测定酸不溶性木质素。性洗此法现已得到美、英等国的公认。 二、方法原理 季按盐[例如+六烷基三甲基溴化铵(Cetyltrimethly ammonium bromide,简称CTAB)],是一种表面活性剂,在硫酸溶液[c(H2SO4)=0.5mol·L-1]中能有效地使动物饲料、植物样品中蛋白质、多糖、核酸等组分水解、湿润、乳化、分散,而纤维素及木质素则很少变化。酸一洗涤剂法就是利用这个原理.将试样用CTAB的H2SO4溶液(酸-洗涤剂)煮沸lh,过滤,洗净酸液后烘干,根据残渣的质量计算酸性洗涤剂纤维(%)。 本法适用于谷物及其加工品、饲料、牧草、果蔬等植物茎秆,叶、果实以及经测定粗脂肪后的任何试样中粗纤维的测定。 三、仪器及设备 回流装置。250mL玻璃三角瓶上附橡皮塞及冷凝玻瑞管八号玻璃滤器((40mL~50mL ),或古氏坩埚;真空泵抽滤装置。 四、试剂 (1)酸性洗涤剂溶液{p[CH3CH2)15(CH2)3N·Br]=20g·L-1,c(H2SO4)=0.50mol·L-1}:称取十六烷基三甲基溴化铵(化学纯)20g加到1000 mL硫酸溶液[c(H2SO4)=0.50mol·L-1〕中,摇动,使之溶解; (2)酸洗石棉。 五、操作步骤 称取通过1mm筛的风干试样1.000g或相当量的鲜样,放入250 mL三角瓶中,在室温下加入酸性洗涤剂溶液100 mL。加热,使之在5min~10min内煮沸。刚开始沸腾时计算时间,装上冷凝管回流60min。注意调节加热温度,使整个回流过程始终维持微沸状态。 取下三角瓶,转动内容物,用已知质量(m1)的玻璃坩埚式滤器或古氏坩埚减压抽滤。过滤时,先用倾泻法过滤,将酸性洗涤剂溶液滤干后,用玻棒将残渣搅散,加入900C~100℃的热水倾洗3次~4次,减压抽滤,洗净酸液后将残渣转移入滤器中,重复水洗,仔细冲洗滤器的内壁,至酸-洗涤剂洗尽为止。用丙酮同样洗涤滤器两3次,直到滤出液无色为止。抽干滤渣中的丙酮,放入1000C鼓风式干燥箱中干燥3h,冷却后称其质量(m2)。 六、结果计算 粗纤维(酸性洗涤纤维)%= 式中;m2——粗纤维和空坩埚质量,g; m1——空坩埚质量,g; m ——烘干样品质量,g. 两次平行测定结果允许差 样品中酸性洗涤纤维% 允许差% <5 0.5 5~25 1 >25 2 参考资料:土壤农业化学分析方法
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