食品微生物检验菌落总数测定方法的效果探讨

在食物领域，食品数测饮食安全一直是微生物检一个热点问题，其直接关系人的验菌身体健康，甚至在某些情况会危及人的落总生命安全。因此，定方受到了社会各界的效果重点关注，而在当前社会环境下，探讨食物安全问题的食品数测诱导因素有很多，如食物在生产加工过程中、微生物检储存过程中等都可能会污染微生物，验菌进而导致食用者出现腹泻、落总呕吐等症状，定方影响其健康状态。效果笔者在自身工作经验基础上，探讨研究食物微生物菌落总数测定方式，食品数测望对相关人员的工作和学习有所启发。 

从食物菌落总数定义可以看出，其主要是利用一定培养方式，最终在实验结束后得到的菌落总量。而这个总量对于食品而言具有十分关键的意义，能为食品检验提供一定支撑，保障人们的食品安全。因此，展开讨论食品微生物检验菌落总数测定效果，具有现实而积极的意义。

1 食品微生物检验菌落总数的意义

从食品微生物检测流程和最终目的可以看出，其具有以下意义：①在检测总量基础上，为食品卫生安全评价提供一定的数据依据;②对比食物的菌群总量，可发现食物是否过期，营养构架是否正常有序，及是否拥有食用价值等;③可对食物划定食物保质期，确定食物可正常食用的时间，进而提升食物的食用安全性。综上，检定食物的菌群总量具有十分重要的意义，因此需对其予以相应重视。但应注意，在检定过程中除了要依据相关标准，还应在检定对象基础上选择相应的检定方式，以提升检定数据的准确性和适用性。

2 相关材料和统计工具

检测材料：生乳样品;检测工具：TTC检测工具、1 mL与10 mL灭菌试管、水浴箱等;其他工具：培养皿、灭菌吸管、营养琼脂、测定瓶、温箱、试管架等。统计工具：统计工具以SPSS13.0为主，采用t检验对比两种方法，P<0.05为差异有统计学意义。

3 食品微生物学检验菌落总数测定方式与效果分析

3.1 平板计数法

此类菌落总量检定方式的原理为：按照一定比例稀释样品，然后对适当稀释比例的样品在培养基上进行培养一段时间，对培养后的菌落进行计数的方法即为平板计数法。多种标准中均涉及该检定方式，如GB/T 8538—1995、GB/T 5750.12—200、GB/T 4789.2—2003及GB 4789.2—2010等，不同规范中对温度和时间的具体要求都有所差异。

以120例食品为检定对象，标准以GB 4789.2—2010为基础，进行食物微生物群菌落检定，其中选取样品25 g，置于生理盐水(225 mL)中;利用灭菌后的吸管，取适量稀释液，利用生理盐水将其稀释1 000倍和10 000倍，然后选择适量的稀释液，将其滴入直径为8～9 cm的无菌平皿中。取两个无菌培养皿，置入1 mL空白稀释液，设置对照组，向其中加入琼脂培养基，然后均匀转动培养皿，使培养基凝固，翻转平皿。时间应控制在48～50 h，环境温度控制在36～38 ℃，其具体流程如图1所示，具体检定效果如表1所示。

需注意的是，由于平板技术检测法在实际运用过程中，其检测对象主要是实验室设定或规定的微生物，而事实上由于外界因素的影响，会有其他类型的微生物附着在检定食物上，影响检测，进而导致检定数据出现异常情况，降低了检测微生物的准确度;依托选择性培养基或相应的培养情况，无法对其中涉及的微生物进行有效的区分，且在微生物中加入稀释液，可能会出现某种抑制效果。为将菌落总量情况准确展示出来，应以单位样品进行展示。

3.2 TTC检测法

该类检测方原理为：脱氨酶为很多细菌的代谢物，该类物质为催化剂，可进行还原活动，在加入TTC后，会形成一种红色产物，进而将相关细菌染色，然后对染色产物进行计数。当然，若检测对象中存在抗生素，则培养菌种不繁殖，因此并不会形成红色。而若检测对象不存在抗生素，那么在将菌种加入后，其会快速繁殖、代谢，而代谢过程会催化形成一些氢，然后氢在TTC还原试剂作用下，生成红色物质，通过对红色物质的分析，进而完成菌落总数检测，其反应过程如图2所示。而从该类检测方式的流程和材料可以看出，一方面在检测过程中，应避免或剔除检测对象中的抗生素;一方面此检测方式具体要求较低，无需特殊检测设备，且操作简单不复杂，耗时也较短，适用于食品卫生检测部门、乳品场、牧场等地方的检测。

以120例食品为检定对象，首先，在检测检定对象前，对提前对其中涉及的吸管、容器及耗材等进行消毒，保障在无菌情况下进行实验;其次，在检测对象中加入TTC(0.5%浓度，1 mL)，形成染色培养基，应注意的是在培养基形成的过程中，要控制其浓度，通常情况的浓度为0.005%，同时在接种和培养条件上，按照平板计数法执行，其具体检测结果如表1所示。

3.3 两类检定方式效果比较

综上，对平板计数法、TTC检测法检定效果进行集中比较可以看出(如表1所示)，两类方式均能达到检定微生物菌群总量的效果，可靠性和稳定性都较为稳定。

3.4 结果分析

目前，在当前社会环境下，食品安全拥有非常重要的地位，人们对其的关注度更高。究其原因，尽管目前社会得到了广泛的发展，促使食品行业发展进入更高维度，但实际出现了大量的食品安全问题，不仅影响社会的安全稳定，还严重影响人们的生命健康安全。一方面食品生产流程存在一定缺陷，导致食物受到各类微生物的侵蚀，从而从结构上破坏了食品的营养和结构特征，若人食用会导致其出现腹泻等症状，严重情况下可能会危及相关人员的生命安全。一方面食品在存放过程中，由于超过其保质期，而导致其衍生大量微生物，进而降低食物的使用价值。因此，无论是相关检测单位还是食品生产企业都需做好食品的安全检测，以提升食品的食用价值。

事实上，微生物菌落总数检测技术拥有很多，如Soleris实时光电微生物快速检测技术、阻抗法、平板计数法和TTC培养基法等，上述以平板计数法和TTC培养基法为出发点，检验两者检测效果，发现两者均能达到较好的检验效果，两者有优势也有侧重点。从以上120例实验检测对象发现，两者均有较好的检测效果，且平板计数法和TTC培养基法检测效果差异不大，其统计学差异不大。由此可以看出，相关单位在进行检测时，应充分考虑检测对象和环境，合理选择其中的检定方式，以提升检定的有效性和针对性。如TTC培养基检测技术拥有的简便、快速、无需特殊设备等优点。

4 食品微生物学检验菌落总数的质量控制
质量控制措施的实施，在于保证检测结果的稳定性与可靠性，因此相关单位或人员需对其予以相应重视，要详细规划控制方案和措施，具体可以从以下几个方面控制。

①以素质为出发点，提升检定人员技术素养。检验人员的操作水平对于检验结果的准确性有着直接的影响，所以检验人员要定期进行进修和学习，提高自身的操作水平;同时检验人员也应当具备高度的责任心和严谨的工作态度，可以根据自身具备的专业素质做出正确的判断。

②质量为出发点，优化实验设备和实验环境。首先，在环境因素方面，应依据检定对象和实验方向，降低湿度、温度对培养皿的影响;其次，在检定仪器设备上，以依据实验室规范和相关标准，对其进行校对和检测维护，同时针对其中关键因素要重点关注，试剂和培养基的配制流程应严格按照相关标准，控制其相关质量，如在储藏上应依据检定对象和相关标准，保障在通风条件或冷藏处理。需注意的是，在制度试剂或培养基时，相关人员应详细记载其制作日期，以防止因时间过短或过长影响最终的检定效果，如何时加入稀释液、合适进行温度控制及何时完成最终流程等。

③严格控制试剂和培养基的质量。微生物检测效果受培养基和试剂质量的影响，因此在操作过程中，要严格安全规范和标准，执行相关的消毒程序，并将其储藏在通风和干燥环境下，对于需要冷藏的要依据规定进行存放。此外，在存取试剂和培养基时，需对用材进行详细登记，从而更加清晰掌握其使用期限，以防出现使用过期试剂和培养基的情况，最终提升检测效果。

5 结语

综上，目前食品微生物菌群检测拥有很多检定方式，均具有一定良好效果。相关人员在选定的过程中，除了要依据国家相关标准外，还应依据食物对象合理选择检定方式，以在达到检定效果的同时，控制其成本输出。据此，本文以平板计数法和TTC检测法检测为方向，探究其食品微生物检验菌落总数测定的效果，具有一定参考价值。当然技术的进步，离不开应用和研究的支撑，在此希望相关研究人员，能在现有基础上，研究符合国家食物菌落总数变化趋势的检定方式，以为我国的食品安全奠定良好基础。

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