褐变黑枸杞抗氧化作用的研究（三）

4、褐变黑枸褐变黑枸杞对果蝇急性氧化应激损伤的杞抗影响

双氧水产生的自由基诱导果蝇产生氧化应激损伤。由图2可知，氧化枸杞能够有效延长果蝇存活时间，作用且随着枸杞浓度的褐变黑枸增加，果蝇平均存活时间逐步延长。杞抗其中，氧化相比于红枸杞组，作用褐变黑枸杞高剂量组果蝇平均存活时间最长。褐变黑枸雌、杞抗雄性果蝇生长趋势基本一致，氧化且呈剂量依赖关系。作用雌性果蝇的褐变黑枸平均存活时间高于同剂量组雄性果蝇。

5、杞抗褐变黑枸杞对果蝇体内SOD.CAT等抗氧化酶活力及MDA含量的氧化影响

饲喂含枸杞的培养基45d后，收集果蝇测定抗氧化相关酶的活力。由图3可知，与对照组相比，各剂量组果蝇体内T-SOD和CAT活力均有所提高，脂质过氧化物MDA含量均有一定程度的降低。与红枸杞低剂量组相比，褐变黑枸杞高剂量组果蝇体内SOD活力显著提高（P＜0.05），其中，雌性果蝇效果更显著；与对照组相比，红枸杞组果蝇体内CAT活力无显著性差异，高剂量的褐变黑枸杞可显著提高果蝇体内CAT活力（P＜0.05），与红枸杞高剂量组相比，高剂量的褐变黑枸杞可显著提高雌性果蝇体内CAT活力；与对照组相比，红枸杞组果蝇体内MDA含量无显著性差异，高剂量的褐变黑枸杞可显著提高果蝇体内MDA含量（P＜0.05），与红枸杞高剂量组相比，高剂量的褐变黑枸杞可显著提高雄性果蝇体内MDA含量（P＜0.05）。

6、褐变黑枸杞对果蝇抗氧化相关基因表达水平的影响

由图4可知，与对照组相比，各剂量组SOD1、SOD2和CATmRNA表达水平有一定程度的提高，其中，红枸杞组无显著性差异，褐变黑枸杞组SOD1、SOD2mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）。与红枸杞高剂量组相比，高剂量的褐变黑枸杞显著提升了雌性果蝇体内SOD2基因mRNA的表达。MTH是感应细胞外信号的偶联接受因子，MTH基因的下调可以增强体内抗氧化水平，延缓果蝇衰老。由实验结果可知，在饮食中添加一定量的枸杞可以在一定程度上下调MTH基因的表达。与对照组相比，红枸杞组无显著性差异，褐变黑枸杞可以对果蝇体内MTH基因的下调产生显著性影响（P＜0.05）。同时，与红枸杞低剂量组相比，高剂量组褐变黑枸杞果蝇体内MTH基因显著下调（P＜0.05）。

三、讨论

衰老是个微妙复杂的生命进程，是指生物体各细胞、器官和组织的形态结构和生理功能随着年龄的增长而进行的复杂、缓慢、全身性的退化过程。在衰老机制的研究中，自由基学说受到了广泛关注。该学说认为，清除体内过量自由基是抗衰老、延长寿命的一个有效途径。SOD、CAT是体内清除0^2-、H²O²、0H-等自由基的主要抗氧化酶。MDA是自由基作用于脂质发生过氧化反应的产物，可以引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，严重损害细胞机能，通常作为机体脂质过氧化程度的主要指标。

果蝇作为典型的抗氧化、抗衰老动物模型。实验结果显示，枸杞能够延长果蝇寿命，褐变黑枸杞延寿效果更显著，且呈剂量依赖关系。同时，急性损伤实验中，褐变黑枸杞能够有效减轻H₂O₂引起的氧化损伤。酶活力测定结果显示，与红枸杞组相比，饲喂褐变黑枸杞组果蝇体内SOD、CAT酶活力显著升高，MDA含量明显下降。Realtime-PCR结果显示，褐变黑枸杞组果蝇体内抗氧化酶SOD1、SOD2和CATmRNA表达水平显著上调，MTHmRNA表达水平显著下调。因此，褐变黑枸杞体内抗氧化活性很可能是通过上调内源性抗氧化酶的基因表达实现的。

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