高效液相色谱法测定北沙参中的蔗糖及其指纹图谱(二)
S2号样品溶液,高效连续进样6次,液相进行HPLC指纹图谱分析。色谱沙参分别记录各共有峰的法测保留时间和峰面积,并对其峰面积结果进行统计分析,定北结果见表7(其中4号峰为蔗糖色谱峰)。中的蔗糖指纹表7结果表明,图谱各共有峰峰面积的高效相对标准偏差均小于3%,说明该方法精密度良好。液相 S2号样品溶液,色谱沙参在室温下保存,法测分别于0、定北2、中的蔗糖指纹4、图谱8、高效24h测定,结果见表8。由表8可知,各共有峰峰面积的相对标准偏差均小于3%,说明北沙参样品溶液在24h内是稳定的。 取S2号样品,按照样品溶液的制备方法,平行制备6份供试液,分别进样,记录HPLC色谱峰面积,计算北沙参样品中的蔗糖含量,结果见表9。由表9可知,测定结果的相对标准偏差均小于3%,说明该方法具有良好的重复性。 取已知蔗糖含量的北沙参粉末约2g,精密称定,平行6份,分别加入蔗糖对照品约60mg,按照样品溶液的制备方法制备供试液,进行HPLC测定,结果见表10。由表10可知,平均回收率为98.85%,表明该方法准确度较高。 将对照品溶液和各批北沙参样品溶液分别进样,记录HPLC色谱数据。选择了6个色谱峰为共有峰,以4号峰为参照峰,计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积值,结果见表11、表12。 采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统研究版(2004A),对10批北沙参药材的指纹图谱进行相似度分析。该软件具有生成校对照图谱的功能,相似度计算方法为夹角余弦法,可支持多点校正。首先将实验数据导入中药指纹图谱相似度计算软件,选定4号峰为参比峰,设定中位数的匹配模式,将色谱峰进行多点校正后自动匹配,即自动生成对照谱峰,相似度计算结果见表13。由表13可知,与对照指纹图谱相比,10批北沙参药材平均相似度为0.985,相似性结果良好;北沙参药材之间的相似度值为0.917~1.000,说明各批药材间存在差异。因此本实验所建立的HPLC指纹图谱可作为北沙参药材质量控制的有效手段之一。 建立了HPLC-ELSD法测定北沙参蔗糖含量的方法,该法测定蔗糖保留时间稳定,测定结果准确、精密度高、回收率符合检测要求。与紫外检测器比较,具有干扰少、基线无漂移、专属性强等特点。建立了北沙参药材的指纹图谱,不同来源北沙参药材之间虽存在一定差异,但整体相似度良好,可作为北沙参药材的质量控制的有效手段之一。2020版药典中并没有对北沙参的含量进行规定,仅通过性状鉴别无法全面的评价药材质量,本研究可以为更好地评价北沙参的质量提供参考。 相关链接:蔗糖,北沙参,乙腈 声明:本文所用图片、文字来源《化学分析计量》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系2.4 精密度试验
2.5 稳定性试验
2.6 重复性试验
2.7 回收试验
2.8 指纹图谱的建立
2.9 指纹图谱相似度分析
3 结语
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