电子烟烟液中游离态和质子态烟碱的测定及分布（二）

1 材料与方法

1.1 材料、电烟试剂和仪器

选择11款市售电子烟烟液样品，烟液其中Arabica-A和Arabica-B，中游Mallika-A和Mallika-B分别为同一香气风格，离态除标示烟碱质量分数外，和质配方组成一致。态烟另外，碱的及分选择4款pH和香精组成（包括烟草、测定西瓜、电烟薄荷、烟液绿豆）不同、中游未添加烟碱的离态烟液配方。共15款烟液样品具体信息见表1。和质

正己烷（色谱纯，态烟泰国RCI Labscan公司）；二氯甲烷（色谱纯，碱的及分美国Tedia有限公司）；丙二醇、甘油（USP级，国药集团化学试剂有限公司）；去离子水（电阻率18.2 MΩ﹒cm）；乙酸、氢氧化钠（AR，上海凌峰化学试剂有限公司）；正十七烷（≥98.5%，北京百灵威科技有限公司）；烟碱标准溶液（4 000 μg/mL异丙醇溶液，上海安谱科技有限公司）；水杨酸烟碱盐、苹果酸烟碱盐（质量分数为25%的水溶液）、酒石酸烟碱盐（结晶体，质量分数>99%）（自制）。

CPE205电子天平（感量0.000 01 g）、通用型pH计（瑞士Mettler Toledo公司）；Milli-Q50超纯水仪（美国Millipore公司）；7890B气相色谱仪（GC）、7890B/5975C气相色谱-质谱联用仪（GC-MS，美国Agilent公司）；Talboys多管式涡旋混合器（上海安谱科技有限公司）；RJ-TDL-40F低速多管式离心机（无锡瑞江分析仪器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 PG-VG体系样品的制备

根据实验要求，将丙二醇（Propylene glycol, PG）和甘油（Vegetable glycerin, VG）以一定比例混合，作为雾化溶剂。分别添加一定量的水杨酸烟碱盐和苹果酸烟碱盐，配制一定烟碱浓度的PG-VG体系样品。

1.2.2 中性水制备

取一定量的去离子水，煮沸20 min除去CO2，密封后冷却至室温。使用前以0.01 mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.0±0.2。每批次样品处理均需重新制备。

1.2.3 pH测定

参考相关研究方法，称取1.0 g烟液样品，10 mL中性水稀释，涡旋混合10 min，静置20 min后，使用经过校准的pH计测定样品pH。

1.2.4 烟碱总量测定

参考CORESTA第62号推荐方法（CRM No. 62），称取1.0 g电子烟烟液样品，加入10 mL去离子水、5 mL 8 mol/L氢氧化钠溶液和20 mL含正十七烷内标的正己烷萃取液，涡旋振荡60 min，离心分层，取有机相，采用GC法测定。分析条件：

色谱柱：DB-17毛细管柱（30 m´0.25 mm´0.25 µm）；升温程序：170 ℃（10 min）；进样口和FID检测器温度：270 ℃；进样量：1.0 μL；分流比：10׃1；载气：氦气（He）；载气流量：1.5 mL/min；氢气流量：30 mL/min；空气流量：400 mL/min；尾吹气（N2）流量：3 mL/min。

1.2.5 游离态与质子态烟碱测定

分别取适量烟碱标准溶液和正十七烷内标储备液，用二氯甲烷稀释定容，配制烟碱浓度分别为1.0、5.0、20.0、50.0、100.0、200.0 μg/mL，且正十七烷内标浓度为50.0 μg/mL的标准工作溶液。

准确称取0.2 g左右电子烟烟液样品，加入10 mL中性水、50 μL正十七烷内标溶液和10 mL二氯甲烷，涡旋混合萃取30 min，2 500 r/min离心10 min，取有机相，GC-MS测定游离态烟碱质量分数。

在水相溶液中加入1 mL 1.0 mol/L氢氧化钠溶液使质子态烟碱转化为游离态，再加入50 μL正十七烷内标溶液和10 mL二氯甲烷，涡旋混合萃取30 min，2 500 r/min离心10 min，取有机相。水相部分重复上述萃取过程进行二次萃取，取有机相。采用GC-MS法分别测定烟碱质量分数，以两次萃取液测定结果之和为质子态烟碱质量分数。

GC-MS条件：

色谱柱：HP-INNOWAX (30 m´0.25 mm´0.25 µm)；升温程序：100 ℃（1 min）5℃/min180 ℃（5 min）30℃/min240 ℃（5 min）；进样量：1.0 μL；分流比：50׃1；载气：氦气，流量1.0 mL/min；进样口和传输线温度均为240 ℃；离子源温度：230 ℃；选择离子扫描（SIM）模式，烟碱定量离子为84(m/z)，定性离子为133、162(m/z)。

1.2.6 数据处理

使用SPSS 26.0软件进行数据统计分析，使用Origin 9.5软件作图。

2 结果与讨论

2.1 烟碱形态测定方法验证

2.1.1 萃取试剂选择

游离态烟碱易溶于有机相，而质子态烟碱在水中的溶解性更强。液液两相萃取法利用烟碱不同形态的这一特性，对游离态和质子态烟碱进行两相萃取。

考察3种常用于烟碱测定的萃取试剂（二氯甲烷、正己烷和甲苯），其均表现出了较好的疏水性特征，其中正己烷的疏水性能最佳，甲苯和二氯甲烷在20 ℃时有一定溶解性，二氯甲烷的水中溶解量为2%左右，对两相萃取的影响较小。

进一步考察3种试剂对同一烟碱盐型电子烟烟液的两步萃取效率（图2）。采用正己烷时第一次萃取不完全，在第二次萃取中烟碱响应较高，萃取效率不佳。甲苯中的烟碱响应值和单次萃取效率均较低。根据峰面积响应值计算，二氯甲烷中第二次萃取的烟碱响应值仅为第一次萃取的1.47%，单次萃取效率最高，疏水性和灵敏度良好，适用于不同形态和浓度范围广的烟碱萃取和分离。因此，选择二氯甲烷作为萃取溶剂。

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