糖料作物中蔗糖的测定（旋光法）

一、糖料糖方法选择的作物中蔗依据

糖料作物主要指甘蔗和糖用甜莱，它们所含糖分几乎全是测定蔗搪。前者可直接压汁测定糖含量，旋光后者则须用水浸提后测定。糖料糖测定蔗糖的作物中蔗的方法有旋光法、拆光法和容量法等，测定其中广泛采用的旋光是旋光法，其特点是糖料糖简单、快速、作物中蔗准确，测定但需用旋光计或检糖计。旋光比重法和折光法不够准确。糖料糖

没有检糖(旋光)计时，作物中蔗可以选用适于常量测定的测定化学方法，例如，蔗糖经HCI水解转化后用铜还原-直接滴定法测定还原糖，再计算蔗糖的含量。

二、方法原理

旋光法测糖的原理是基于糖类分子具有不对称碳原子，可使通过的光的偏振面旋转。当光的波长、温度和液层厚度一定时，溶液中蔗糖的浓度与偏振光面旋转角度成正比，因此，可用旋光计或检糖计测定蔗糖的含量。各种糖类都有其特定的比旋，例如蔗糖水溶液的比旋〔α] ²⁰_D为+66.5,葡萄糖是+52.8，果糖是一92.8，麦芽搪是+118等。

比旋光度〔α] ²⁰_D是指100mL溶液中含有l00g旋光物质，通过液层厚度(即管长)I dm(分米)，在温度20^oC时，钠光源(D=589.3nm)偏振面所旋转的角度。

式中:α——旋光仪测定的旋转角度;

T——管长(dm);

V——溶液体积(mL);

W——旋光性物质(糖)质量(g)。

W /V为糖的浓度，用g/100mL表示时，则旋光角度 

当管长一定时， ，式中k为常数，随旋光物质的比旋和管长而改变。蔗糖的比旋［α］²⁰_D为+66.5，如将管长固定为2dm，则

式中:m——与100mL溶浓相当的样品质量(g)。

国际上为统一蔗糖旋光法测定的标准，检糖计的标度采用国际度((⁰S)表示，即指26g纯蔗搪在20^oC时溶成100mL水溶液(相对密度为1.100)，通过2dm旋光管的旋光角度规定为100 ⁰S，直接刻有⁰S值的旋光计称为检糖(旋光)计。26g称为糖品的1“规定量”。检糖计的1⁰S相当于100mL溶液中含有0.26g蔗糖，读数为X^oS，表示100 mL被测液中含有0.26×X⁰S(g)蔗糖。若样品称重为26g，制成糖溶液的体积为100 mL时，则每1 ⁰S即表明样品含蔗糖1%，用此测读非常方便。蔗糖%=

如用旋光仪测定，旋光仪的读尺刻度(360⁰)与检精仪的读尺刻度((100 ⁰S)之间具有下述关系：

在20^oC，国际糖标尺的标准石英板=100⁰S=34.620⁰土0.002⁰(D=589.3nm)

由于1⁰S=O.26 g/100 mL蔗糖溶液，故：

式中α是一般旋光仪上读得的角度数。

三、仪器及设备

旋光仪；检糖计；电动植物捣碎机。

四、试剂

1、碱性乙酸铅溶液:称取Pb (OAc )₂·3H₂O(化学纯)60g和PbO(化学纯)20g加水10mL研磨，放入蒸发皿中，盖上表面皿，在沸水浴上加热至原黄色变白或紫白色，然后边搅边加190mL水，冷却，澄清，过滤，密封保存。

2、饱和Na₂SO₄溶液:硫酸钠(Na₂SO₄，化学纯)加入水中至饱和。

3、酚酞指示剂:0.1g酚酞溶于100mL乙醇。

五、操作步骤

1、待测液制备将试样按纵横剖面均匀切细放入电动捣碎机的杯中与等量水捣成糊状物。称取52g糊状物(即26g样品)，用热水将其洗入100 mL容量瓶中，总体积约为90mL,放入80⁰C恒温水浴中加热30min，其间摇动几次，使糖分浸出。稍冷后，滴加1mL～5mL碱性乙酸铅溶液以沉淀蛋白质。过量的乙酸铅可滴加饱和Na₂S₄溶液除掉。冷却后，用水定容(如液面有泡沫可滴加乙醚消除)。过滤，弃去初滤液20mL左右，取澄清液待测。

2、测定先用清亮的待测液洗旋光管2次～3次，然后将溶液装满管中，使管口液体呈一凸起，将活动的圆玻璃片与旋光管垂直方向插人盖上(可避免留有气泡)。将管盖扭紧，检查管中是否有气泡。然后测读旋光仪上的旋光度或栓糖计上的⁰S，取3次测读的平均数。

六、结果计算

七、用于糖旋光的温度校正

1、精糖——如果试验≥99的糖旋光不是在20⁰C的温度下测定时，可用下列公式折算成20⁰C的旋光：

P₂₀=P₁[1+0.0003(t一20)]

其中P_t=测定温度t的旋光读数(用于旋光≥96 ⁰S的甜菜糖和粗蔗糖，不会有明显的误差)。

2、粗糖——当测定温度不在20⁰C时，如果粗蔗糖的旋光＜96 ⁰S，可以用下列公式计算到20⁰C的旋光:

P₂₀=Pt+0. 0015(P_t一80) (t一20)

式中:P_t和t与1同。

如果已知糖中果糖的%(假如蜂蜜和蔗糖制品=约1/2还原糖)，用下列公式:

P₂₀ = P_t+0.00035(P_t一20)一0.00812F(t一20)

式中:P_t和t同1中一样;S为蔗塘%,F为果塘%。

如果糖的组分是平均的正常组分，则这些公式得出的结果与旋光计在20℃时获得的结果十分一致。

参考资料：土壤农业化学分析方法