基于气相指纹图谱技术研究鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干白扁豆花的成分（一）

白扁豆花是基于技术豆科扁豆属植物扁豆Dolichos lablab L.的干燥花，呈扁平不规则三角形，气相具有解暑化湿、指纹和中健脾之功效，图谱用于治疗痢疾、研究泄泻、鲜白赤白带下等症，扁豆扁豆扁豆在我国具有悠久的花冻花和花应用历史。经典名方“新加香薷饮”中采用的干白干白是鲜白扁豆花，而有的成分则采用的是干扁豆花，两者内在成分的基于技术差异可能决定了其药效的差异。本项研究的气相目的在于研究鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和晒干白扁豆花的指纹成分差异，为冻干扁豆花替代鲜扁豆花提供科学的图谱数据支持，同时，研究通过气相质谱(GC-MS)方法对鲜白扁豆花的挥发性化学成分进行鉴定，这些挥发性成分的鉴定，为白扁豆花的药理和临床应用提供基础支持。

1 材料

1.1 仪器与试剂

Agilent7890B气相(GC)色谱仪，Agilent 7890B-7000C GC-MS联用仪(配有Mass Hunter质谱工作站， NIST 14标准谱库),中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版本；甲醇(色谱纯)。

1.2 样品

白扁豆花采自于河北中医学院药草园，白扁豆种子经河北中医学院王乾老师鉴定为Dolichos lablab L.的种子。

2 方法与结果

2.1 样品的处理

2.1.1 鲜白扁豆花：

摘取鲜白扁豆花立即置于-80℃低温冰箱中，冷冻，而后于液氮中研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

2.1.2 冻干白扁豆花：

摘取鲜白扁豆花立即置于-80 ℃低温冰箱中，而后于冷冻干燥机内冻干，研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

摘取鲜白扁豆花，晒干，研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

2.2 GC色谱条件

2.2.1 GC色谱指纹图谱条件：

DB-1毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);程序升温：柱初始温度为80 ℃,以10 ℃ /min的速率升至300 ℃,保持10 min; 进样口温度：300 ℃;载气：N2;载气流速：1 mL/min; 分流比：20 ∶1。

2.2.2 GC-MS色谱条件：

色谱柱、升温程序同GC色谱指纹图谱条件；载气：He; 载气流速：1 mL/min; 分流比：100 ∶1。EI离子源；离子源温度：230 ℃;四极杆温度：150 ℃;电子能量：70 eV;接口温度：280 ℃;质量范围：50～600 m/z。

3 结果与讨论

3.1 方法学研究

主要针对进样精密度、样品重复配制后的重复性以及样品溶液的稳定性进行研究，以鲜扁豆花为研究对象，将所得的图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),通过各色谱图之间相似度比值，进而确定方法的适用性。本方法的精密度、重复性和稳定性研究相似度均在0.99以上，说明方法适用性良好。

3.2 各类白扁豆花成分的差异

对鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干扁豆花的成分进行分析，每个种类的样品分别重复检测3次，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)对结果进行分析。分析结果见图1、表1。

从图1的结果可以看出，鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干白扁豆花种类内部之间，差异较小，说明该方法的重现性较好；鲜白扁豆花和冻干白扁豆花之间的相似度在0.950以上，说明相似度非常接近；鲜白扁豆花和干白扁豆花之间的相似度在0.720左右，有较大的差异。根据气相图谱可以看出，鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干扁豆花之间成分的种类并无显著的差异，仅是成分的含量差异较大。从提取溶液的颜色来看，鲜白扁豆花和冻干白扁豆花为绿黄色，而干白扁豆花为浅黄色。

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