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双水相体系萃取纯化紫甘蓝色素(二)

(2)PEG的双水色素质量分数对选择性系数k的影响

在50mL离心管中加入5.4g硫酸铵(硫酸铵的质量分数为18%),4.2g色素粗提液,相体系萃分别加入9.0g、取纯10.5g、化紫12.0g、甘蓝13.5g、双水色素15.0gPEG原液,相体系萃调节体系pH为5,取纯双水相萃取后的化紫选择性系数和花青素与糖类杂质的分配系数结果如图2所示。
 

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由图2可知,甘蓝随着PEG质量分数的双水色素增加,花青素与糖类杂质的相体系萃分配系数都呈下降的趋势,花青素的取纯降低幅度更大一些,选择性系数k存在先下降后上升再下降的化紫趋势,在PEG质量分数为16%达到最高。甘蓝

(3)pH对选择性系数k的影响

在50mL离心管中加入5.4g硫酸铵,12.0gPEG6000原液(PEG质量分数为16%),4.2g色素粗提液,分别调节体系pH为1、2、3、4、5,双水相萃取结果如图3所示。
 

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如图3可知,随着pH的增大,选择性系数先升高后降低,在pH为3时达到最高,原因可能是因为紫甘蓝色素属于矢车菊类色素,在pH为3时色素大多呈分子状态存在,更易被萃取到上相中,因此使得测得的K花最大。

(4)料液加入量对选择性系数k的影响

在50mL离心管中加入5.4g硫酸铵,12.0gPEG6000原液(PEG质量分数为16%),调节体系pH为3,分别加入1.8g、2.4g、3.0g、3.6g、4.2g色素粗提液,双水相萃取结果如图4所示。


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如图4可知,随着料液加入量的增多,选择性系数呈现先升高后下降的趋势,在料液加入量为12%时,选择性系数达到最高。当料液加入量超过12%时,下相当中花青素的含量开始上升,导致K开始下降,选择性系数k开始呈现下降趋势。

2、正交实验结果及分析

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从上表可以看出,硫酸铵的添加量依然是越多,选择性系数越高,但实验过程不宜再增加了,原因是一方面过高的硫酸铵浓度容易在下相析出结晶,另一方面增加了生产成本和在上相色素中的残留量,因此确定为20%。四个因素的影响次序为:粗提液的用量>pH>硫酸铵的用量>PEG的用量,综合单一因素实验,最佳实验条件:粗提液的质量分数为12%,硫酸铵质量分数为20%,pH为3.5,PEG的质质量分数为15%,花青素的选择性系数为750.26。

三、结论

采用PEG/硫酸铵双水相体系萃取纯化紫甘蓝中花青素。正交实验最佳的萃取条件为:粗提液的质量分数为12%,硫酸铵质量分数为20%,pH为3.5,PEG的质量分数为15%,花青素的选择性系数为750.26。虽然使用PEG6000/硫酸铵双水相体系对紫甘蓝色素有很好的选择性,能够实现紫甘蓝色素与其糖类物质的分离,并且花青素的分配系数K对选择性系数的影响程度远大于多糖的分配系数K,但后续如何实现聚合物和花青素的分离仍是企业生产所面临的难题。

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