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荷叶总黄酮提取工艺及其抗氧化性研究（二）

2.结果与讨论

2.1芦丁标准曲线及回归方程

根据图1可看出，荷叶样液浓度与吸光度值在0～80mg/L之间成正比，总黄有良好的酮提线性关系，样液浓度越高，取工其抗吸光值越大。艺及氧化

2.2单因素实验结果

2.2.1料液比对总黄酮提取率的性研影响

从图2看出，料液比增大，荷叶黄酮含量缓慢增加，总黄并且料液比为1∶10时黄酮含量最大，酮提为1.45g/100g；当料液比继续增大时，取工其抗黄酮含量不再增加，艺及氧化反而减小。性研这是荷叶因为，当荷叶粉末的总黄量不变，乙醇的酮提量不断增大，黄酮与乙醇接触的可能性变大。当黄酮完全溶解时，黄酮含量为定值，乙醇的量仍旧增大，从而出现沉淀，使黄酮含量减小。

2.2.2实验温度对总黄酮提取率的影响

由图3可见，黄酮含量随着温度的增高而增加，并且在实验温度为45℃时黄酮含量达到最大，为1.28g/100g。当实验温度超过45℃时，随着温度的升高黄酮含量不再增加，而是呈现下降趋势。这是因为从热动力学角度来看，温度升高会加速物质的运动，还会加速溶剂与被提取物之间的物质交换，从而提高荷叶总黄酮的析出；但是黄酮本身具有还原性，温度过高会导致黄酮类化合物发生水解反应，所以荷叶总黄酮的析出减少。

2.2.3乙醇浓度对总黄酮提取率的影响

由图4可见，乙醇浓度为75%时，黄酮含量最高，为1.56g/100g，乙醇浓度更高时，黄酮含量下降。造成这个现象的原因可能是因为在一定范围内所用乙醇浓度越大，溶剂极性就越小，而且黄酮类物质极性偏低。根据相似相溶原理，溶剂极性小有利于荷叶总黄酮类化合物的析出；但是当乙醇浓度超过一定范围时，溶剂的极性不再减小，反而增大，所以荷叶总黄酮的析出减少。

2.2.4超声时间对总黄酮提取率的影响

由图5可见，随超声时间增加黄酮含量逐渐上升。60min时，黄酮含量出现峰值1.55g/100g。时间延长，黄酮含量下降。因为提取初期，超声时间长利于荷叶总黄酮的析出，但是时间过长，加热导致黄酮类化合物水解，黄酮含量下降。

2.3最佳工艺条件优化

根据正交表排列，进行正交实验，得到表2所示结果。由表2可知，影响总黄酮提取率的4种因素的影响程度为：D＞B＞C＞A，即：溶剂浓度、温度、料液比、时间。所以超声提取荷叶总黄酮最优的提取组合为：

A₁B₂C₃D₂，即：提取溶剂为75%浓度的乙醇溶液，料液比选用1∶12（g/mL），超声时间为45min，提取温度为45℃。

2.4荷叶总黄酮抗氧化性研究

2.4.1总黄酮对DPPH·清除能力测定

由图6可看出，荷叶总黄酮对DPPH自由基的清除能力与总黄酮的浓度成正比例关系，当黄酮含量达到0.400mg/mL时，清除率达到了58%，相比较VC浓度为0.400mg/mL时清除率偏低。由此可以得出，荷叶总黄酮对DPPH的清除能力比较强，稍弱于VC。

2.4.2总黄酮对羟自由基清除能力测定

由图7看出，荷叶黄酮对羟自由基有一定的清除能力。随着荷叶总黄酮和Vc质量浓度的增加，两种物质清除羟自由基的能力逐渐增加。当黄酮的浓度与Vc浓度相同时，对羟自由基的清除率分别为52.9%、59.5%。由此可得荷叶总黄酮清除羟自由基的能力比Vc稍弱。

3.结束语

实验通过对超声波法提取荷叶总黄酮过程中的四种可能影响实验结果的因素进行研究与分析，并对总黄酮的抗氧化能力进行测定，得出四种因素对总黄酮提取含量的影响大小顺序为：乙醇浓度＞超声温度＞料液比＞超声时间。通过单因素与正交实验得出最佳的实验方案为：超声时间45min，温度45℃，料液比1∶12（g/mL），乙醇浓度75%。荷叶总黄酮具有一定的抗氧化性，且抗氧化性随浓度的增大而增强，但比等浓度的Vc的清除能力要低，表明荷叶提取物可以作为有效的抗氧化成分来进行开发研究。

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