基于色谱法和电泳法建立饮料中索马甜的分析测试方法(二）

（3）标准曲线方程

采用确定的基于色谱条件，分别对不同浓度索马甜标准溶液进行测定，色谱索马以标准溶液的法和法建分析方法浓度为横坐标，对应的电泳峰面积为纵坐标，建立标准曲线，立饮料中结果如图3所示。测试所得索马甜标准曲线方程为Y=3.62568X-47.04715，基于相关系数为0.9983，色谱索马表明在10～500mg／L浓度范围内其线性关系良好。法和法建分析方法

（4）检出限及定量限

重复测定20次含有10mg／L索马甜的电泳基质样品，以结果标准偏差的立饮料中3倍计算出方法的检出限为1.6mg／L，以结果标准偏差的测试10倍计算出定量限为5.3mg／L，表明该方法能满足食品中甜味剂的基于检测要求。

（5）回收率和精密度

采用本文所建立的色谱索马方法对市售的15个批次的饮料类产品(包括碳酸类饮料可乐、雪碧，法和法建分析方法茶类饮料红茶、绿茶、花茶，果汁饮料，维生素饮料)进行分析检测，均未发现索马甜的检出，与其产品标签成分中未明示使用索马甜的情况一致。

为验证方法的可行性，进一步对饮料样品进行加标试验。在此过程发现，直接向各类饮料中加入索马甜，均无法检出，分析其原因可能是由于各类饮料中高浓度的糖含量引起蛋白聚沉所导致的，因此，加标回收试验均是在对饮料进行10倍稀释后的基础上添加。不同样品的索马甜加标试验超高效液相色谱结果如图4所示，索马甜加标回收率及精密度试验结果见表1。

根据表1结果，不同样品索马甜加标回收率在82.8％～102.3％，相对标准偏差均在6％以内，表明该方法具有良好的准确度和重复性。

2、SDS-PAGE分析方法的建立

SDS-PAGE是分析蛋白质常用的方法，能够实现定性及半定量分析。配制不同浓度的索马甜蛋白水溶液，其SDS-PAGE结果如图5所示。

由图5可以看出，索马甜蛋白条带超过20kD，与文献中报道的分子量22kD大小吻合，随着浓度的增大条带颜色逐渐加深、条带变宽，其中浓度为10mg／L时，蛋白条带隐约可见，浓度为增加至25mg／L时，条带已更加清晰、明显，由此可见，SDS-PAGE法满足GB2760-2014最大允许使用量0.025g／kg的分析要求。

对各类饮料进行10倍稀释后随机添加不同浓度索马甜标准溶液，按照前述的电泳分析方法进行处理并电泳，其结果如图6所示。由图中可以看出，各加标样品电泳条带与索马甜标准样品一致，由此可见利用SDS-PAGE法能够实现对饮料中索马甜进行分析。

三、结论

本论文分别基于超高效液相色谱法和SDS-PAGE法建立了饮料中索马甜的分析测试方法。通过样品加标实验，结果表明两种方法均可实现对饮料中索马甜的检测，其灵敏度都可满足GB2760-2014中最大限值使用的检测要求。此外，对于较为复杂的基质样品，通过采用两种方法进行相互佐证，能够获得更为可靠的结果。

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