食品添加剂的测定之防腐剂的测定（二）

(2)提取

吸取滤液100mL置于250mL分液漏斗中，食品加入6mol/L盐酸溶液至酸性(用石蕊试纸试验)，添加再加6mol/L盐酸3mL，测定分别用40，腐剂30，测定30mL乙醚用旋转方法依次分三次提取，食品每次摇动不少于5min，添加合并三次提取液置于另一250mL分液漏斗中。测定

用蒸馏水洗涤乙醚提取液至不呈酸性(用石蕊试纸试验)，腐剂将提取液置于锥形瓶中，测定在45℃水浴上回收并挥干乙醚(或用索氏抽提法)。食品

(3)滴定

加入30mL中性醇醚混合溶液，添加加入10mL水及2滴酚酞指示剂，测定以0.05mol/L氢氧化钠准溶液滴定至微红色为止，腐剂记录消耗碱量。测定

4、注意事项

①本滴定法适用于样品中苯甲酸含量在0.1％以上的分析。

②提取剂可以用三氯甲烷代替。

③当样品中苯甲酸含量较低时，氢氧化钠标准溶液的浓度可配成0.01mol／L为宜。

④用乙醚提取苯甲酸时，不可上下振荡以免乳化而不易分离，应用旋转分液漏斗进行提取，若形成乳化，可用玻棒搅拌，或进行一两次上下激烈振荡。

(二)气相色谱法

1、原理

样品酸化后，用乙醚提取苯甲酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定与标准系列比较定量。

2、试剂

①醚：不含过氧化物。

②油醚：沸程30～60℃。

⑧盐酸：(1+1)。

④无水硫酸钠。

⑤氯化钠酸性溶液：40g／L。于氯化钠溶液(40g/L)中加少量盐酸(1+1)酸化。

⑥苯甲酸标准溶液。准确称取苯甲酸0.2000g，置于100mL容量瓶中，用石油醚-乙醚(3+1)混合溶剂并稀释至刻度(此溶液每毫升相当于2.0mg苯甲酸)。

⑦苯甲酸标准使用液。吸取适量的苯甲酸标准溶液，以石油醚-乙醚(3+1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50μg，1001μg，150μg，200μg，250μg苯甲酸。

3、仪器

气相色谱仪，具有氢火焰离子化检测器。

4、操作方法

①样品提取：称取2.5g事先混合均匀的样品，至于25mL带塞量筒中，加0.5mL盐酸(1+1)酸化，用15mL、10mL乙醚提取两次，每次振摇1min，静置分层后将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中，合并乙醚提取液。用3mL氯化钠酸性溶液(40g/L)洗涤两次，静置15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25min容量瓶中，用乙醚洗量筒及硫酸钠层，洗液并入容量瓶。加乙醚至刻度，混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚-乙醚(3+1)混合溶剂溶解残渣，备用。

②色谱参考条件：

a．色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内涂装以5％DEGS+1％H₃P0₄同定液的60—80目Chromosotd WAW。

b．气流速度：载气为氮气，50mL/min(氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件)。

c．温度：进样口230℃；检测器230℃：柱温1700℃。

③测定：进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标、相应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线。同时进样2μL样品溶液。测得峰高与标准曲线比较定量。

参考资料：食品中有毒有害物质检测

相关链接：防腐剂，苯甲酸，三氯甲烷，无水硫酸钠