红参多糖对小鼠抗氧化能力的研究

红参，红参五加科植物，多糖对小的研其性温、鼠抗味甘、氧化香味较浓。红参红参相比于人参组织更加致密，多糖对小的研更利于保存。鼠抗红参，氧化是红参一种既可食用，又可药用的多糖对小的研植物，具有广泛的鼠抗应用和开发前景。红参中主要活性成分为皂苷和多糖。氧化长期以来，红参对红参的多糖对小的研研究一般都集中在人参皂苷上，忽略了红参多糖活性成分的鼠抗功效。关于红参多糖的研究集中在提取条件的优化以及生物活性方面，研究表明，红参多糖具有抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力、调节血脂和血糖、抗炎等作用。目前，对于红参多糖的体内抗氧化能力研究较少。人与外界持续接触，包括呼吸，外界污染，放射线照射等因素，在人体内产生自由基。研究表明，癌症、衰老等其他疾病与过量的自由基的产生有关联。抗氧化系统是可与免疫系统比拟的，具有完善和复杂功能的系统，抗氧化能力越强，人体越健康。此次实验以红参多糖（redginsengpolysaccharidesRGPs）为研究对象，通过比较正常对照组小鼠与RGPs低、中、高剂量组小鼠脏器系数，血清和肝、肾、脾组织中MDA含量、SOD和GSH-Px活力，研究RGPs对小鼠的体内抗氧化活性，为RGPs今后的进一步开发利用提供依据。

一、材料与方法

1、材料与试剂

红参：购自吉林省长白县。

RGPs制备方法：红参粉末，加入适量蒸馏水，超声提取。离心（4000r/min，10min），取上清，sevag法脱蛋白，然后浓缩，透析溶液，80%乙醇醇沉静置，过滤离心后干燥得红参多糖。采用苯酚-硫酸法，测得RGPs的多糖含量为67.83%。

普通昆明小鼠（体重量20～35g），购于黑龙江中医药大学；无水乙醇、正丁醇、三氯甲烷、冰醋酸等（分析纯），蛋白定量、丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶测定试剂盒，南京建成生物工程研究所。

2、仪器与设备

电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司型号：E-10D），恒温水浴锅（上海申胜生物技术有限公司型号：W202B），紫外分光光度计（美国Varian公司型号：Cary100），小型高速冷冻离心机（Saitexingyi离心机仪器有限公司型号：TGL-16M），小型高速常温离心机（上海安亭科学仪器厂型号：TDL-80-2C），酶标仪（美国伯乐），旋涡混匀器（上海梅香仪器有限公司型号：ZW-A），组织匀浆机（宁波新芝科器研究所型号：DY89-I），电热恒温鼓风干燥箱（昆山一恒仪器有限公司型号：DHP-9012）。

3、方法

（1）动物分组及剂量

小鼠适应喂养后随机分为4组：正常对照组（0.9%生理盐水，0.2mL/d）、RGPs低剂量组（100mg/kg，0.2mL/d）、RGPs中剂量组（200mg/kg，0.2mL/d）、RGPs高剂量组（400mg/kg，0.2mL/d）。每组8只，连续灌胃30d，自由摄食饮水。

（2）指标测定

小鼠禁食24h，取眼球血，离心（4℃，3000r/min，离心10min），取上清液，待测。处死小鼠，解剖取肝、肾、脾用冷生理盐水漂洗，滤纸擦拭干净，称重。计算脏器指数。肝、肾、脾分别用生理盐制备成10%匀浆，保存于-20℃待测。按照试剂盒说明测定血清和肝、肾、脾组织中MDA含量、SOD和GSH-Px活力。

脏器指数（mg/g）=器官质量/小鼠体质量

（3）数据处理

实验数据采用SPSS软件处理，用平均值±标准差表示结果，P＜0.05为显著差异。

二、结果与分析

1、RGPs对小鼠肝、肾、脾指数的影响

实验可以通过脏器指数一定程度上反映灌胃RGPs后对小鼠器官的影响，进而初步分析RGPs的毒副安全性。由表1可知，连续灌胃30天后，与正常对照组相比，RGPs对小鼠肝指数、肾指数和脾指数均没有显著性差异（P＞0.05），说明灌胃RGPs不影响小鼠的肝脏、肾和脾。

3、RGPs对小鼠血清及各组织MDA含量的影响

MDA是膜脂过氧化过程中最重要的产物之一，可通过测定MDA的含量，了解膜脂过氧化和膜系统受损程度。从表2可以看出，与正常对照组相比，RGPs3个剂量组均可降低血清和各组织中MDA的含量，其中RGPs高剂量组对血清和肝、肾、脾中MDA的含量分别降低了12.8%、40.23%、45.63%和39.34%。红参多糖3个剂量组连续灌胃小鼠30天后，RGPs低剂量组可降低血清和肝组织MDA含量，但无显著差异，对其他组织中MDA含量的降低具有差异显著性。RGPs中、高剂量组均能显著降低血清和各组织中MDA的含量。RGPs不同剂量组对降低肾组织中的MDA含量无显著差异。这可能是RGPs具有稳定细胞膜结构，抑制了脂质进行过氧化反应。表明RGPs能够稳定细胞膜结构，抑制小鼠体内的脂质过氧化过程，从而减轻自由基对机体损伤的程度。

2、RGPs对小鼠血清及各组织SOD活力的影响

SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它可以把有害的超氧自由基转为过氧化氢，然后过氧化氢酶和过氧化物酶将其完全分解为无害的水，因此SOD在细胞免受氧化损伤的过程中起了重要作用。从表3可以看出，RGPs3个剂量组均可提高血清和各组织中SOD的活性，并呈现剂量关系，其中RGPs高剂量组对血清和肝、肾、脾中SOD的活性分别提高了14.86%、20.6%、30.71%和36.08%。连续灌胃小鼠30天后，与正常对照组相比，RGPs低剂量组使血清中SOD的活性提高，无显著差异，对组织中SOD活性提高具有差异显著性。RGPs中、高剂量组均能显著提高血清和各组织中SOD的活性。RGPs中、低两个剂量组对提高肝组织中的SOD活性无显著差异。

4、RGPs对小鼠血清及各组织GSH-Px活力的影响

GSH-Px是生物体内广泛存在的抗氧化酶之一，能够阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，是生物体内重要的活性氧自由基清除剂。从表4可以看出，RGPs3个剂量组均可提高血清和各组织中GSH-Px的活性，并呈现剂量关系，其RGPs高剂量组对血清和肝、肾、脾中GSH-Px的活性分别提高了39.18%、38.25%、24.37%和59.22%。小鼠灌胃30天后，与正常对照组相比，RGPs低剂量组显著提高血清和肝、肾组织中GSH-Px的活性，对脾组织中GSH-Px的活性提高无显著差异。RGPs中、高剂量组均能显著提高血清和各组织中GSH-Px的活性。RGPs中、低两个剂量组对血清中的GSH-Px的活性提高无显著差异。

三、结论

通过RGPs对小鼠体内抗氧化活性的硏究可知，RGPs能显著降低血清和肝、肾、脾组织中MDA的含量，并提高SOD和GSH-Px的活力，且呈现明显的剂量关系。表明RGPs具有较好的清除体内过多自由基的作用，从而防止自由基氧化对机体导致的损伤，进而起到抗氧化作用。因此，RGPs具有一定的体内抗氧化能力，为RGPs今后的开发利用提供科学依据。

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