HPLC法测定兰州拉面汤中核苷类成分含量的研究(二)
精密称取次黄嘌呤、法测黄嘌呤、定兰的研尿苷、州拉中核肌苷、面汤尿苷、苷类腺苷对照品各8mg,成分将次黄嘌呤用2%盐酸一水溶液溶解,含量将黄嘌呤用5%氨水溶解,法测其余对照品用20%甲醇-水溶液溶解,定兰的研分别定容于10mL容量瓶中,州拉中核分别取各对照品溶液1.0mL于同一10mL容量瓶中,面汤定容至刻度,苷类配制成80μg/mL的成分混合对照品储备液。将储备液配制成浓度分别为lμg/mL、含量5μg/mL、法测10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的工作液即得40μg/mL混合对照品溶液。色谱柱:AcclailTM120C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)I流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~3min,2%B;3~3.1min,2%B~3%B;3.1~6min,3%B;6.0~6.1min,3%B~4%B;6.1~9min;4%B~7%B;9.1—17min,7%B;17.1~20min,2%B);流速1.0mL/minl检测波长260nm;柱温30℃;进样量5μL色谱条件进样,重复6次,测得次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷对照品含量的RSD值分别为0.122%、0.295%、0.283%、0.22l%、0.108%、0.154%。结果表明,该仪器精密度良好。 取4号兰州拉面汤6份,按照色谱柱:AcclailTM120C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)I流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~3min,2%B;3~3.1min,2%B~3%B;3.1~6min,3%B;6.0~6.1min,3%B~4%B;6.1~9min;4%B~7%B;9.1—17min,7%B;17.1~20min,2%B);流速1.0mL/minl检测波长260nm;柱温30℃;进样量5μL色谱条件测定,测得兰州拉面汤中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷含量的RSD值分别为0.734%、3.076%、1.496%、0.591%、2.223%、1.707%。结果表明,该方法重复性良好。 取1号兰州拉面汤样品,按照色谱柱:AcclailTM120C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)I流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~3min,2%B;3~3.1min,2%B~3%B;3.1~6min,3%B;6.0~6.1min,3%B~4%B;6.1~9min;4%B~7%B;9.1—17min,7%B;17.1~20min,2%B);流速1.0mL/minl检测波长260nm;柱温30℃;进样量5μL色谱条件测定,分别在0h、3h、6h、9h、12h测定,测得次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷含量的RSD值分别为0.666%、1.607%、1.327%、0.663%、1.469%、2.010%。结果表明,供试品溶液在12h内稳定。 取1号兰州拉面汤,在添加量10μg/mL的水平下,测得次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷回收率分别为95.61%、99.68%、99.19%、102.31%、97.92%、101.50%。RSD分别为1.536%、0.879%、0.949%、0.466%、0.972%、0.777%。 分别取6个品牌兰州拉面汤样品各15份,按照取6种新熬制的兰州拉面汤,编号分别为l号、2号、3号、4号、5号、6号,对每个样品分别进行0h、1.5h、3h、4.5h和6h的熬煮,熬煮过程中在汤中慢慢加人少量水,保证熬煮过程中汤的浓度不变,将兰州拉面汤经0.22μm滤膜过滤,待上机测定。方法制备供试品溶液,按照色谱柱:AcclailTM120C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)I流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~3min,2%B;3~3.1min,2%B~3%B;3.1~6min,3%B;6.0~6.1min,3%B~4%B;6.1~9min;4%B~7%B;9.1—17min,7%B;17.1~20min,2%B);流速1.0mL/minl检测波长260nm;柱温30℃;进样量5μL的色谱条件进行测定,测得6种核苷成分在不同熬煮时间的平均含量及总含量,结果见表2~表7。 声明:本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系 相关链接:黄嘌呤,次黄嘌呤,尿苷,肌苷2.2.2 精密度试验
2.2.3 重复性试验
2.2.4 稳定性试验
2.2.5 加标回收率试验
2.3 样品含量测定
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