天山雪莲细胞培养技术、化学成分和药理作用研究进展 （五）

3.6抗缺氧

天山雪莲为高山植物，天山其醇提物具有明显的雪莲细胞抗缺氧作用，其机制可能与降低血乳酸水平、培养促进细胞无氧酵解和改善体内氧自由基代谢的技术究进作用有关。科研人员验证了天山雪莲细胞提取物的化学和药抗急性低压缺氧的功效并探讨作用机制，认为，成分在模拟海拔8000m急性低压缺氧环境下，理作雪莲培养细胞提取物能有效地清除或抑制氧自由基的用研生成，预防脑组织和血清中GLU和LD的天山堆积；通过保护细胞膜上Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的功能，预防能量代谢障碍所引起的雪莲细胞继发毒性反应，减轻细胞水肿，培养保护脑组织和细胞的技术究进完整性及其功能，有效地阻止急性低压缺氧的化学和药损伤。

3.7抗辐射

雪莲细胞提取物具有抗辐射作用。成分周湘洁等连续14d给予小鼠雪莲细胞提取物，理作然后行一次性全身照射Co60γ2.5Gy处理，照射后各组小鼠继续每日灌胃给药14d。检测结果表明，小鼠被Co60γ射线照射后的外周血白细胞数、淋巴细胞数、红细胞数、血红蛋白及血小板含量均显著下降；照射后小鼠继续灌服雪莲细胞提取物14d显著促进了这些指标的回升。贾景明等连续30天灌胃给予小鼠雪莲细胞乙醇提取物，在第20天行Co60γ照射，剂量1.0Gy，每天1次共10次。结果发现，与空白给药组相比，雪莲细胞乙醇提取物能使受照射小鼠的外周白细胞数、SOD活性和平均存活时间显著增加，骨髓嗜多染红细胞微核率显著降低。赵晓玫等用雪莲培养物胶囊对辐射小鼠进行抗辐射实验，得到一致的结果。

3.8对治疗再生障碍性贫血(AA)的疗效

建立辐射及免疫介导的AA小鼠模型，于造模当日开始灌胃给药，每天灌胃2次，连续给药14d。检测结果表明，雪莲细胞多糖组在给药14d后，血常规红细胞计数、血红蛋白含量等多项数据相比再生障碍性贫模型组有显著的提高。同时，给予雪细胞多糖提取物后，明显促进CD34+造血细胞在整体细胞中所占比率，并可不同程度减轻辐射照射诱发小鼠骨髓造血功能病理学改变，其活性与再造生血片相当。以上结果初步验证了天山雪莲细胞多糖对辐射免疫介导的再生障碍性贫血小鼠模型的治疗活性，提示雪莲细胞多糖提取物对治疗再生障碍性贫血有一定的治疗及改善活性。

3.9抗肥胖作用

科研人员以雪莲培养物中提取、纯化的咖啡酰奎尼酸类物质为对象，通过消化酶体外抑制活性实验和高脂喂养大鼠肥胖抑制实验，对咖啡酰奎尼酸类物质的抗肥胖作用机理进行初步探究。研究发现，随着样品中咖啡酰奎尼酸类物质终浓度的提升，对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和猪胰脂肪酶的抑制率逐渐提高，呈正相关趋势；雪莲培养物中咖啡酰奎尼酸类物质可以有效降低高脂饲养大鼠的体重、Lee's指数，肝重、附睾脂肪系数，降低其血清和肝匀浆中的总胆固醇、甘油三酯、低密度胆固醇、丙二醛、脂肪酶水平，提高高密度胆固醇、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平，从而起到调节脂肪代谢紊乱，减低脂质过氧化物生成，提高抗过氧化物生成，减少高脂喂养大鼠脂肪吸收、堆积作用；雪莲培养物中咖啡酰奎尼酸类物质能够降低高脂喂养大鼠脂肪代谢关键酶脂肪酸合成酶、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的表达水平，提高过氧化物增值激活物受体-α水平、激活胆固醇7α-羟化酶的表达，从而起到抗肥胖的作用。

3.10其他

细胞试验研究发现，不同质量浓度雪莲培养物(12.5~200μg/ml)对多种癌细胞生长皆有抑制效果。其中，以黑色素瘤细胞B16F10和肝癌细胞Hep3B抑制效果最为明显，当雪莲培养物添加量达200μg/ml，72h后癌细胞存活率降至对照组的20％以下。此外，异体移植动物试验中，通过口服雪莲培养物治疗，可以延缓小鼠体内肝癌细胞Hep3B肿瘤增长速度。

雪莲培养物具有很强的抗氧化能力。全面评估雪莲培养物的自由基清除能力，结果表明，雪莲培养物的抗氧化能力指数ORAC(oxygenradicalabsorbancecapacity)是5196μmolTE/g，是丁香粉的1.65倍。丁香粉的ORAC是3144.46μmolTE/g，是2007年美国农业部数据库（各种食物的ORAC值）中ORAC最大的物质。雪莲培养物中的酚酸类物质以及雪莲培养物多糖经试验证实具有强抗氧化作用[。张会会等通过动物试验也证实了雪莲细胞培养物的抗氧化作用。

研究人员还发现，雪莲培养物能够延长小鼠负重游泳时间，降低血乳酸量，提高肝糖原含量，提示雪莲培养物有抗疲劳的效果。

4结语及展望

经过研究人员30年来的不懈努力，天山雪莲细胞的培养技术已经比较成熟，能够获得含有较高活性物质含量的细胞系，且能实现规模化培养；经过系统的成分研究，已确定了60余种化学成分；开展了多个方向的体外试验和动物体内功效研究，为天山雪莲细胞的未来临床产品开发方向奠定了良好的研究基础。

2010年，天山雪莲细胞已经获卫生部批准为“新资源食品”（即“新食品原料”），并迅速实现商品化，商品名为“雪莲培养物”。目前市场上已有多款以雪莲培养物为主要原料的功能食品，如具有保健食品资质的雪莲培养物红景天胶囊，以及雪莲人参多肽养生酒及雪莲燕窝等普通食品。除食品外，雪莲培养物在药品和日化用品方面也有潜在应用，已经形成了多项发明专利。

尽管在食品领域的应用已经初具规模，但是由于其来源植物天山雪莲是一味传统的中药材，且其优良疗效已被亚洲人民广泛认可，所以天山雪莲细胞最大的研究价值还是在于其作为药材的开发。开展雪莲细胞的成药性研究、实现其在药品中的应用，是该品种研发的必然方向。基于上面的综述，天山雪莲细胞在培养技术、化学成分研究以及药理作用方面均取得了较多进展，但不可否认，作为细胞培养物，与天然雪莲在化学成分和药理作用方面还是存在一定的差异，需要在今后加强这两个方面的研究，以期为天山雪莲细胞作为天山雪莲的替代品或者作为新的创新药原料的应用和开发提供坚实基础。

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